Klinisk Utdanning Center (Norsk)

Spørsmål 1. Hva er kliniske og genetiske funksjoner av paroksysmal natt hemoglobinuria (PNH)?

Paroksysmal natt hemoglobinuria (PNH) er en sjelden lidelse preget av kronisk hemolyse, økt risiko for venøs trombose, og benmarg feil. Intravaskulær hemolyse resultater i fritt hemoglobin, som i sin tur kan bidra til smerte, tretthet, esophageal dysmotility, og erektil dysfunksjon.

PNH er også preget av mutasjon i PIGA genet og mangel på GPI-knyttet proteiner., Den glycophosphoinositol (GPI) fraksjonen gir en rekke ulike proteiner for å legge til cellemembranen. Det er mer enn 20 gener som er nødvendig for syntese av GPI ankere, en som PIGA genet ligger på X-kromosomet. En ervervet mutasjon i ett PIGA genet i en mann, eller i ett eksemplar i en kvinne på grunn av X inaktivering (lyonization), er tilstrekkelig til å produsere mangler i uttrykk av GPI-knyttet proteiner., Hvis denne mutasjonen oppstår i en reproduserende hematologisk stilk cellen, utvidelse av at PNH «klone» kan føre til en GPI-mangelfull celle befolkningen, potensielt i alle hematologisk linjene.

Spørsmål 2. Hvorfor er flowcytometri brukes til diagnose PNH?

flowcytometri er sensitiv og mer informativ enn mutasjon analyse. Ved samtidig å vurdere ulike celle bestander, flowcytometri kan vurdere størrelsen på PNH klone i hver av de hyppigst berørte blodkreft celle linjer (erytrocytter , granulocytter og monocytter).,1,2 Dermed, flowcytometri kan avgjøre om pasienten har redusert (delvis) uttrykk for GPI proteiner (ie, PNH type II) eller fullstendig fravær av GPI proteiner (ie, PNH type III). Pasienter med type III er mer sannsynlig å ha alvorlige hemolyse, siden fraværet av GPI-knyttet CD55 gjør RBCs mer følsomme for komplement-mediert lyse.

Spørsmål 3. Hva er eksempel type og flowcytometrisk metode som brukes av Quest Diagnostics?

Perifert blod er det eneste passende eksempel for flowcytometri PNH testing. Bein marg prøver anbefales ikke.,

Vår test for PNH (test kode 16433) er en høy følsomhet analyse som vurderer GPI-knyttet CD59 på erytrocytter. Den bruker en kombinasjon av flere GPI-koblede markører og pan-GPI ligand, FLAER (fluorescerende aerolysin), for å vurdere granulocytter og monocytter. Flere av verdens antigener er brukt til å skille de forskjellige celle bestander.

Spørsmål 4. Hva er følsomhet for analysen?

Den analytiske følsomheten for vår analyse er 0,01%; den kan oppdage 1 GPI-mangelfull celle i 10 000 celler., Imidlertid tilstrekkelig hypocellularity, som kan oppstå i aplastisk tilfeller kan begrense følsomhet. Når dette skjer, vil det være angitt på rapporten.

Spørsmål 5. Hva er betydningen av PNH klone størrelse på diagnosen?

På presentasjonen, de fleste pasienter med PNH vil ha en dominerende PNH klone er synlig i 3 analysert linjene. Men graden av hemolyse, bestemt PIGA mutasjon, og presenterer symptomer kan påvirke klone størrelse., Små PNH kloner (under 5%) kan også være forbundet med myelodysplastic syndromer (MDS) og aplastisk anemi, så klinisk sammenheng er viktig i de studier som viser en liten PNH klone.3

Spørsmål 6. Følgende diagnose, hva intervall på oppfølging testing anbefales?

Retningslinjer anbefaler å overvåke PNH klone størrelse med jevne mellomrom.1 Hvis pasienten er medisinsk stabil, flowcytometrisk evaluering en gang i året kan være tilstrekkelig. Men dersom symptomene kommer tilbake, eller resultatene for andre laboratorieprøver viser progresjon, hyppigere testing anbefales., Serial flowcytometri er spesielt nyttig for å finne svar etter initiering av eculizumab immunterapi.4

hos pasienter med aplastisk anemi eller lav karakter MDS og en første negative PNH test, oppfølging testing for å kontrollere for fremveksten av en PNH klone kan være angitt.

1. Borowitz MJ, Craig FE, DiGiuseppe JA, et al. Retningslinjer for diagnostisering og oppfølging av paroxsymal natt hemoglobinuria og relaterte lidelser ved flowcytometri. Cytometry B Clin Cytom. 2010;78:211-230.,
2. Hernandez-Campo PM, Almeida J, Sanchez ML, et al. Normal mønstre ofexpression av glykosylfosfatidylinositol-forankret proteiner på ulike undergrupper av peripheralblood celler: en referanseramme for diagnostisering av paroksysmal natt hemoglobinuria. Cytometry. 2006;70B:71-81.
3. Wang H, Chuhjo T, Yasue S, et al. Kliniske betydningen av en mindre bestand av paroksysmal natt hemoglobinuria-type celler i beinmargen feil syndrom. Blod. 2002;100:3897-3902.
4. Hillmen P, Unge NS, Schubert J, et al., Den utfyller inhibitor eculizumab i paroksysmal natt hemoglobinuria. N Engl J Med. 2006;355:1233-1243.