Centro de educación clínica (Español)

Pregunta 1. ¿Cuáles son las características clínicas y genéticas de la hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN)?

la hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN) es un trastorno poco frecuente caracterizado por hemólisis crónica, aumento del riesgo de trombosis venosa e insuficiencia de la médula ósea. La hemólisis intravascular resulta en hemoglobina libre, que, a su vez, puede contribuir al dolor, fatiga, dismotilidad esofágica y disfunción eréctil.

la HPN también se caracteriza por mutación en el gen PIGA y deficiencia en proteínas ligadas a GPI., La mitad del glicofosfoinositol (GPI) permite que un número de diferentes proteínas se adhieran a la membrana celular. Hay más de 20 genes necesarios para la síntesis de los anclajes GPI, uno de los cuales es el gen Piga ubicado en el cromosoma X. Una mutación adquirida en el único gen PIGA en un varón, o en una copia en una hembra debido a la inactivación X (lionización), es suficiente para producir deficiencias en la expresión de proteínas ligadas a GPI., Si esta mutación ocurre en una célula madre hematológica autorreplicante, la expansión de ese «clon» de HPN puede conducir a una población celular deficiente en GPI, potencialmente en todos los linajes hematológicos.

Pregunta 2. ¿Por qué se utiliza la citometría de flujo para diagnosticar la HPN?

la citometría de flujo es sensible y más informativa que el análisis de mutaciones. Al evaluar simultáneamente diferentes poblaciones celulares, la citometría de flujo puede evaluar el tamaño del clon de HPN en cada uno de los linajes de células hematopoyéticas comúnmente afectados (eritrocitos , granulocitos y monocitos).,1,2 por lo tanto, la citometría de flujo puede determinar si el paciente tiene una expresión reducida (parcial) de proteínas GPI (es decir, HPN tipo II) o ausencia completa de proteínas GPI (es decir, HPN tipo III). Los pacientes con tipo III tienen más probabilidades de tener hemólisis grave, ya que la ausencia de CD55 ligado a GPI hace que los glóbulos rojos sean más sensibles a la lisis mediada por el complemento.

pregunta 3. ¿Cuál es el tipo de muestra y el método citométrico de flujo utilizado por Quest Diagnostics?

la sangre periférica es la única muestra apropiada para la prueba de citometría de flujo HPN. No se recomiendan muestras de médula ósea.,

Nuestra prueba de HPN (código de prueba 16433) es un ensayo de alta sensibilidad que evalúa el CD59 ligado a GPI en eritrocitos. Utiliza una combinación de varios marcadores vinculados a GPI y el ligando pan-GPI, FLAER (aerolisina fluorescente), para evaluar granulocitos y monocitos. Antígenos transmembrana adicionales se utilizan para distinguir las diferentes poblaciones celulares.

Pregunta 4. ¿Cuál es la sensibilidad del ensayo?

la sensibilidad analítica de nuestro ensayo es del 0,01%; puede detectar 1 célula deficiente en GPI en 10.000 células., Sin embargo, una hipocelularidad suficiente, como puede ocurrir en casos aplásicos, puede limitar la sensibilidad. Cuando esto ocurra, se indicará en el informe.

Pregunta 5. ¿Cuál es la importancia del tamaño del clon de la HPN en el momento del diagnóstico?

en el momento de la presentación, la mayoría de los pacientes con HPN tendrán un clon dominante de HPN detectable en 3 linajes analizados. Sin embargo, el grado de hemólisis, la mutación particular de PIGA y los síntomas que se presentan pueden influir en el tamaño del clon., Los clones pequeños de HPN (por debajo del 5%) también pueden estar asociados con síndromes mielodisplásicos (SMD) y anemia aplásica, por lo que la correlación clínica es esencial en aquellos estudios que muestran un clon pequeño de HPN.3

Pregunta 6. Después del diagnóstico, ¿qué intervalo de pruebas de seguimiento se recomienda?

las directrices recomiendan monitorear el tamaño de clon de PNH a intervalos regulares.1 si el paciente está clínicamente estable, la evaluación citométrica de flujo una vez al año puede ser suficiente. Sin embargo, si los síntomas reaparecen o los resultados de otras pruebas de laboratorio demuestran progresión, se recomienda realizar pruebas más frecuentes., La citometría de flujo seriada es particularmente útil para determinar la respuesta después del inicio de la inmunoterapia con eculizumab.4

en pacientes con anemia aplásica o SMD de bajo grado y una prueba inicial negativa de HPN, puede estar indicado realizar pruebas de seguimiento para monitorear la aparición de un clon de HPN.

1. Borowitz MJ, Craig FE, DiGiuseppe JA, et al. Guía para el diagnóstico y monitoreo de hemoglobinuria paroxsimal nocturna y trastornos relacionados por citometría de flujo. Citometría B Clin Cytom. 2010;78:211-230.,
2. Hernandez-Campo PM, Almeida J, Sanchez ML, et al. Patrones normales de expresión de proteínas ancladas a glicosilfosfatidilinositol en diferentes subconjuntos de células sanguíneas periféricas: un marco de referencia para el diagnóstico de hemoglobinuria paroxística nocturna. Citometría. 2006; 70B: 71-81.
3. Wang H, Chuhjo T, Yasue S, et al. Importancia clínica de una población menor de células paroxísticas de tipo hemoglobinuria nocturna en el síndrome de insuficiencia medular. Sangre. 2002;100:3897-3902.
4. Hillmen P, Young NS, Schubert J, et al., El inhibidor del complemento eculizumab en la hemoglobinuria paroxística nocturna. N Engl J Med. 2006;355:1233-1243.