klinikai Oktatási Központ (Magyar)

1.kérdés. Melyek a paroxizmális éjszakai hemoglobinuria (PNH) klinikai és genetikai jellemzői?

paroxizmális éjszakai hemoglobinuria (PNH) egy ritka betegség, amelyet krónikus hemolízis, fokozott vénás trombózis kockázata és csontvelő-elégtelenség jellemez. Az intravaszkuláris hemolízis szabad hemoglobint eredményez, amely viszont hozzájárulhat a fájdalomhoz, a fáradtsághoz, a nyelőcső diszmotilitásához, valamint az erekciós zavarokhoz.

a PNH-t a PIGA gén mutációja és a GPI-hez kapcsolódó fehérjék hiánya is jellemzi., A glikofoszfoinozit (GPI) rész lehetővé teszi számos különböző fehérje kötődését a sejtmembránhoz. Több mint 20 gén szükséges a GPI horgonyok szintéziséhez, amelyek közül az egyik az X kromoszómán található PIGA gén. Az egyetlen PIGA génben szerzett mutáció egy férfiban, vagy egy példányban egy nőben az X inaktiváció (lyonizáció) miatt elegendő ahhoz, hogy hiányosságokat okozzon a GPI-hez kapcsolódó fehérjék expressziójában., Ha ez a mutáció egy önreplikáló hematológiai őssejtben fordul elő, a PNH “klón” terjeszkedése GPI-hiányos sejtpopulációhoz vezethet, potenciálisan minden hematológiai vonalban.

2. kérdés. Miért használják az áramlási citometriát a PNH diagnosztizálására?

az áramlási citometria érzékenyebb és informatívabb, mint a mutációelemzés. A különböző sejtpopulációk egyidejű értékelésével az áramlási citometria képes felmérni a PNH klón méretét az általánosan érintett hematopoietikus sejtvonalak (eritrociták , granulociták és monociták) mindegyikében.,1,2 így az áramlási citometria meghatározhatja, hogy a beteg csökkentette-e a GPI fehérjék (azaz II.típusú PNH) (részleges) expresszióját vagy a GPI fehérjék (azaz III. típusú PNH) teljes hiányát. A III-as típusú betegek nagyobb valószínűséggel súlyos hemolízissel rendelkeznek, mivel a GPI-hez kötött CD55 hiánya érzékenyebbé teszi az RBC-ket a komplement-mediált lízisre.

3. kérdés. Mi a Quest diagnosztika által használt Mintatípus és áramlási citometriai módszer?

a perifériás vér az egyetlen megfelelő minta az áramlási citometria PNH vizsgálatához. Csontvelő minták nem ajánlottak.,

a PNH tesztünk (16433 tesztkód) egy nagy érzékenységű vizsgálat, amely a GPI-hez kapcsolódó CD59-et értékeli az eritrocitákon. A granulociták és a monociták értékeléséhez több GPI-hez kapcsolódó markerek és a pan-GPI ligandum, a FLAER (fluoreszcens aerolizin) kombinációját használja. További transzmembrán antigéneket használnak a különböző sejtpopulációk megkülönböztetésére.

4. kérdés. Mi a vizsgálat érzékenysége?

Vizsgálatunk analitikai érzékenysége 0,01%; 10 000 sejtben képes kimutatni 1 GPI-hiányos sejtet., Azonban elegendő hypocellularitás, amint az aplasztikus esetekben előfordulhat, korlátozhatja az érzékenységet. Amikor ez megtörténik, azt a jelentés jelzi.

5. kérdés. Mi a PNH klón méretének jelentősége a diagnózis során?

bemutatáskor a PNH-ben szenvedő betegek többsége domináns PNH-klónnal rendelkezik, amely 3 elemzett sorban kimutatható. Azonban a hemolízis mértéke, az adott PIGA mutáció, valamint a megjelenítő tünetek befolyásolhatják a klón méretét., A kis PNH klónok (5% alatt) myelodysplasiás szindrómákkal (MDS) és aplasztikus anémiával is társulhatnak, ezért a klinikai korreláció elengedhetetlen azokban a vizsgálatokban, amelyek kis PNH klónt mutatnak.3

6. kérdés. A diagnózist követően milyen időközönként ajánlott a nyomon követési vizsgálat?

Irányelvek javasoljuk, hogy rendszeres időközönként ellenőrizze a PNH klón méretét.1 ha a beteg klinikailag stabil, az áramlási citometriai értékelés évente egyszer elegendő lehet. Ha azonban a tünetek megismétlődnek, vagy más laboratóriumi vizsgálatok eredményei progressziót mutatnak, gyakoribb vizsgálat ajánlott., A Soros áramlású citometria különösen hasznos az eculizumab immunterápia megkezdése utáni válasz meghatározásához.4

aplasztikus anémiában vagy alacsony fokú MDS-ben szenvedő és kezdeti negatív PNH-tesztben szenvedő betegeknél a PNH-klón megjelenésének monitorozására irányuló nyomonkövetési vizsgálat indokolt lehet.