klinisk Uddannelsescenter (Dansk)

spørgsmål 1. Hvad er de kliniske og genetiske træk ved Paro ?ysmal natlig hæmoglobinuri (PNH)?

Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) er en sjælden lidelse, der er karakteriseret ved kronisk hæmolyse, øget risiko for venøs trombose, og knoglemarv fiasko. Den intravaskulære hæmolyse resulterer i frit hæmoglobin, som igen kan bidrage til smerter, træthed, spiserørsdysmotilitet og erektil dysfunktion.

PNH er også kendetegnet ved mutation i PIGA-genet og mangel på GPI-bundne proteiner., Glycophosphoinositol (GPI) – delen gør det muligt for en række forskellige proteiner at binde sig til cellemembranen. Der er mere end 20 gener, der kræves til syntese af GPI-ankre, hvoraf den ene er PIGA-genet placeret på Chromos-kromosomet. En erhvervet mutation i det enkelte PIGA-gen hos en mand eller i en kopi hos en kvinde på grund af INAC-inaktivering (lyonisering) er tilstrækkelig til at producere mangler i ekspressionen af GPI-bundne proteiner., Hvis denne mutation forekommer i en selvreplikerende hæmatologisk stamcelle, kan udvidelse af denne PNH “klon” føre til en GPI-mangelfuld cellepopulation, potentielt i alle hæmatologiske afstamninger.

spørgsmål 2. Hvorfor bruges Flo ?cytometri til at diagnosticere PNH?

Flo .cytometri er følsom og mere informativ end mutationsanalyse. Ved samtidigt at evaluere forskellige cellepopulationer, flowcytometri kan vurdere størrelsen af PNH klon i hver af de almindeligt berørt hæmatopoietisk celle slægter (erythrocytter , granulocytter og monocytter).,1,2 således kan Flo .cytometri bestemme, om patienten har reduceret (delvis) ekspression af GPI-proteiner (dvs.PNH type II) eller fuldstændigt fravær af GPI-proteiner (dvs. PNH type III). Patienter med type III er mere tilbøjelige til at have alvorlig hæmolyse, da fraværet af GPI-bundet CD55 gør RBC ‘ er mere følsomme over for komplementmedieret lysis.

spørgsmål 3. Hvad er prøvetype og Flo ?cytometrisk metode, der bruges af Diagnosuest Diagnostics?

perifert blod er den eneste passende prøve til Flo .cytometri PNH-test. Knoglemarvsprøver anbefales ikke.,

vores test for PNH (testkode 16433) er et højfølsomheds assay, der vurderer den GPI-bundne CD59 på erytrocytter. Det bruger en kombination af flere GPI-bundne markører og pan-GPI ligand, FLAER (fluorescerende aerolysin), at vurdere granulocytter og monocytter. Yderligere transmembrane antigener bruges til at skelne mellem de forskellige cellepopulationer.

spørgsmål 4. Hvad er følsomheden af analysen?

den analytiske følsomhed af vores assay er 0,01%; det kan detektere 1 GPI-mangelfuld celle i 10.000 celler., Imidlertid kan tilstrækkelig hypocellularitet, som kan forekomme i aplastiske tilfælde, begrænse følsomheden. Når dette sker, vil det blive angivet i rapporten.

spørgsmål 5. Hvad er betydningen af PNH-klonestørrelsen ved diagnose?

Ved præsentation vil de fleste patienter med PNH have en dominerende PNH-klon detekterbar i 3 analyserede slægter. Imidlertid kan graden af hæmolyse, den særlige PIGA-mutation og de præsenterende symptomer påvirke klonstørrelsen., Små PNH-kloner (under 5%) kan også være forbundet med myelodysplastiske syndromer (mds) og aplastisk anæmi, så klinisk korrelation er vigtig i de undersøgelser, der viser en lille PNH-klon.3

spørgsmål 6. Hvilket interval af opfølgningstest anbefales efter diagnosen?

retningslinjer anbefaler at overvåge PNH-klonestørrelsen med jævne mellemrum.1 hvis patienten er klinisk stabil, kan Flo .cytometrisk evaluering en gang om året være tilstrækkelig. Men hvis symptomerne gentager sig, eller resultaterne af andre laboratorietest viser progression, anbefales hyppigere test., Seriel Flo .cytometri er især nyttig til bestemmelse af responsen efter initiering af eculi .umab-immunterapi.4

hos patienter med aplastisk anæmi eller lav kvalitet MDS og en indledende negativ PNH-test kan opfølgningstest til overvågning af fremkomsten af en PNH-klon være indikeret.

1. Borowitz MJ, Craig FE, DiGiuseppe JA, et al. Retningslinjer for diagnosticering og overvågning af Paro .symal natlig hæmoglobinuri og relaterede lidelser ved Flo .cytometri. Cytometri B Clin Cytom. 2010;78:211-230.,
2. Hernandez-Campo PM, Almeida J, Sanchez ML, et al. Normal mønstre ofexpression af glycosylfosphatidylinositol-forankret proteiner på forskellige undersæt af peripheralblood celler: en referenceramme for diagnosticering af paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Cytometri. 2006;70B:71-81.
3. Wang H, Chuhjo T, Yasue S, et al. Klinisk betydning af en mindre population af Paro .ysmale natlige hæmoglobinuri-type celler i knoglemarvssvigt syndrom. Blod. 2002;100:3897-3902.
4. Hillmen P, Young NS, Schubert J, et al., Supplement-hæmmer eculizumab paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. N Engl J Med. 2006;355:1233-1243.