Vraag 1. Wat zijn de klinische en genetische kenmerken van paroxysmale nachtelijke hemoglobinurie (PNH)?
paroxysmale nachtelijke hemoglobinurie (PNH) is een zeldzame aandoening die gekarakteriseerd wordt door chronische hemolyse, een verhoogd risico op veneuze trombose en beenmergfalen. De intravasculaire hemolyse resulteert in vrije hemoglobine, die, op zijn beurt, kan bijdragen aan pijn, vermoeidheid, slokdarm dysmotiliteit, en erectiestoornissen.
PNH wordt ook gekenmerkt door mutatie in het PIGA-gen en deficiëntie in GPI-gebonden eiwitten., De glycophoinositol (GPI) groep laat een aantal verschillende eiwitten toe om zich aan het celmembraan te hechten. Er zijn meer dan 20 genen vereist voor synthese van de GPI-ankers, waarvan één het Piga-gen is dat op het chromosoom van X wordt gevestigd. Een verworven mutatie in het enige PIGA-gen bij een man, of in één kopie bij een vrouw als gevolg van X-inactivatie (lyonisatie), is voldoende om deficiënties in de expressie van GPI-gekoppelde eiwitten te veroorzaken., Als deze mutatie voorkomt in een zelf-replicerende hematologische stamcel, kan de uitbreiding van die PNH “kloon” leiden tot een GPI-deficiënte celpopulatie, potentieel in alle hematologische lijnen.
vraag 2. Waarom is cytometry stroom aan diagnose PNH wordt gebruikt?de Cytometrie van
Flow is gevoelig en informeler dan de mutatieanalyse. Door gelijktijdig verschillende celpopulaties te evalueren, kan cytometry de stroom de grootte van de PNH-kloon in elk van de algemeen getroffen hematopoietic cellijnen (erytrocyten , granulocytes, en monocytes) beoordelen.,1,2 aldus, cytometry kan de stroom bepalen of de patiënt (gedeeltelijke) uitdrukking van GPI proteã nen (ie, PNH type II) of volledige afwezigheid van GPI proteã nen (ie, PNH type III) heeft verminderd. Patiënten met type III hebben meer kans op ernstige hemolyse, omdat de afwezigheid van GPI-gekoppelde CD55 RBCs gevoeliger maakt voor complementgemedieerde lysis.
vraag 3. Wat is de steekproeftype en stroom cytometrische methode die door Quest Diagnostics wordt gebruikt?
perifeer bloed is het enige geschikte monster voor flowcytometrie PNH-testen. Beenmergmonsters worden niet aanbevolen.,
onze test voor PNH (testcode 16433) is een high sensitivity assay die de GPI-linked CD59 op erytrocyten beoordeelt. Het gebruikt een combinatie van verscheidene GPI-verbonden tellers en pan – GPI ligand, FLAER (fluorescente aerolysin), om granulocytes en monocytes te beoordelen. Extra transmembraanantigenen worden gebruikt om de verschillende celpopulaties te onderscheiden.
vraag 4. Wat is de gevoeligheid van de test?
de analytische gevoeligheid van onze Analyse is 0,01%; het kan 1 GPI-deficiënte cel in 10.000 cellen detecteren., Echter, voldoende hypocellulariteit, zoals kan optreden in aplastische gevallen, kan de gevoeligheid te beperken. Wanneer dit gebeurt, zal dit in het verslag worden vermeld.
vraag 5. Wat is de Betekenis van de grootte van de PNH-kloon bij diagnose?
bij de presentatie zullen de meeste patiënten met PNH een dominante PNH-kloon hebben die aantoonbaar is in 3 geanalyseerde lineages. Nochtans, kunnen de graad van hemolyse, de bijzondere PIGA-verandering, en de presenterende symptomen de kloon grootte beà nvloeden., Kleine PNH-klonen (Onder 5%) kunnen ook met myelodysplastic syndromen (MDS) en aplastic bloedarmoede worden geassocieerd, zodat is de klinische correlatie essentieel in die studies die een kleine PNH-kloon tonen.3
Vraag 6. Na de diagnose, welk interval van follow-up testen wordt aanbevolen?
richtlijnen bevelen aan om de PNH-kloon met regelmatige tussenpozen te controleren.1 als de patiënt klinisch stabiel is, kan een cytometrische evaluatie van de stroom eenmaal per jaar voldoende zijn. Echter, als de symptomen terugkeren of de resultaten van andere laboratoriumtesten progressie aantonen, wordt frequenter testen aanbevolen., Seriële flowcytometrie is met name nuttig voor het bepalen van de respons na aanvang van eculizumab-immunotherapie.4
bij patiënten met aplastische anemie of laaggradige MDS en een initiële negatieve PNH-test, kunnen follow-up testen om te controleren op het ontstaan van een PNH-kloon geïndiceerd zijn.
- Borowitz MJ, Craig FE, DiGiuseppe JA, et al. Richtlijnen voor de diagnose en monitoring van paroxsymale nachtelijke hemoglobinurie en gerelateerde aandoeningen door flowcytometrie. Cytometrie B Clin Cytom. 2010;78:211-230.,Hernandez-Campo PM, Almeida J, Sanchez ML, et al. Normale patronen van expressie van glycosylphosphatidylinositol-verankerde eiwitten op verschillende subsets van perifere bloedcellen: een referentiekader voor de diagnose van paroxysmale nachtelijke hemoglobinurie. Cytometrie. 2006; 70B: 71-81.Wang h, Chuhjo T, Yasue S, et al. Klinische significantie van een kleine populatie van paroxysmale nachtelijke hemoglobinurie-achtige cellen bij beenmergfalen syndroom. Bloed. 2002;100:3897-3902.Hillmen P, Young NS, Schubert J, et al., De complementremmer eculizumab bij paroxysmale nachtelijke hemoglobinurie. N Engl J Med. 2006;355:1233-1243.
Leave a Reply