Last Updated on February4,2021By Sagar Aryal
それはまた、Ziehl-Neelsen染色として知られています。
酸性高速染色の目的
この染色の主な目的の目的は、細菌を酸性高速グループと非酸性高速グループに分化させることです。,
Acid Fast Stainの原理
Acid-fast mycobacteriaは、外膜にミコール酸を含み、細胞をワックス状にし、グラム染色などの水性染色による染色に耐性があります。 一次染色であるcarbolfuchsinを細胞に塗布し、熱およびフェノールを使用して染色が耐酸性微生物のワックス状表面に浸透するようにする。 過剰な汚れは、酸性アルコール(エタノールおよび塩酸)による処理で除去される。 次いで、二次染色であるメチレンブルーを細胞に塗布する。,
Ziehl-Neelsen染色試薬
一次染色:0.3%カルボル-フクシン。 50gのフェノールを100mLのエタノール(95%)またはメタノール(95%)に溶解する。 混合物中に3gの塩基性フクシンを溶解し、蒸留水を加えて体積を1Lにする。
脱色溶液:30mLの塩酸を1Lの95%変性アルコールに加える。 使用の前によく冷却し、混合して下さい。 代替脱色試薬(アルコールなし):ゆっくりと250mLの硫酸(少なくとも95%)を750mLの蒸留水に加えます。 使用する前によく冷却し、混合して下さい。
カウンターステイン:0.3%ネチレンブルー。, 3Gのネチレンブルーを1Lの蒸留水に溶かします。
酸速度染色の手順
- 染色前に標本スミアを準備し、固定します。
- 試料の上部に小さなブロッティング紙またはろ紙を置き、スライドをメッシュ表面の沸騰したお湯浴の上に置きます。
- 濾紙を一次汚れ、carbolfuchsinで覆う。 スライドを水浴に3-5分間放置する。 ろ紙が乾燥し始めたら汚れを塗り続けて下さい。,
- ろ紙を取り出し、溶液が透明になるまでスライドを水ですすいでください。
- 酸アルコール脱色剤をスライド上で約10-15秒間実行します。
- スライドを水ですすいでください。
- 塗抹標本を二次または対ステイン、メチレンブルーで1分間覆う。
- スライドを水で静かにすすいでください。
- スライドをbibulous紙で乾かします。,
酸速い汚れの結果の解釈
酸速い:集中的な紫、赤、ストレートまたはわずかに湾曲した棒に明るい赤、単独でまたは小さなグループで発生し、ビーズ表示されることがあります
非酸速い:青い色;また、背景材料は青く染色する必要があります。
制限
- ろ紙は、一次染色の適切な浸透を可能にするために、加熱中に湿った状態で試料と接触していなければならない。,
- Organisms cultivated on blood agar may experience nutrient deprivation, resulting in a lower lipid content in the outer membrane resulting in poor staining.
Examples
Acid-fast: Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium smegmatis.
Non-Mycobacterial bacteria: Nocardia
Coccidian Parasites: Cryptosporidium
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