Acid Fast Tahra – Periaate, Reagenssit, Menettely ja Tuloksen Tulkinta

Viimeksi Päivitetty helmikuu 4, 2021 mennessä Sagar Aryal

Se on myös Ziehl-Neelsen värjäys.

Tavoitteena Happo Nopeasti Tahra

– tärkein tavoite tavoitteena tahra on erottaa bakteerien hapon nopea ryhmä ja ei-happoa nopea ryhmiä.,

Periaatetta Happo Nopeasti Tahra

Acid-fast mykobakteerien sisältävät mycolic happoa niiden ulompi kalvo, jolloin solut vahamainen ja vastustuskykyinen värjäystä kanssa vesipohjaisissa tahrat, kuten Gram-värjäys. Ensisijainen tahra, carbolfuchsin on sovellettu solujen, ja lämpöä ja fenolia käytetään, jotta tahra tunkeutua vahamainen pinta happo-nopea mikro-organismeja. Ylimääräinen tahra poistetaan käsittelemällä happamalla alkoholilla (etanoli ja suolahappo). Soluihin levitetään sen jälkeen toissijainen tahra, metyleenisininen.,

Ziehl-Neelsen Tahra Reagenssit

Ensisijainen Tahra: 0.3% Karbol-fuchsin. Liuotetaan 50 g fenolia 100 mL: aan etanolia (95%) tai metanolia (95%). Liuotetaan 3 g Perus fuchsin seos ja lisää tislattua vettä tuo tilavuus 1 L.
Värinpoisto Ratkaisu: Lisää 30 mL suolahappoa 1 L 95% denaturoitua alkoholia. Jäähdytä ja sekoita hyvin ennen käyttöä. Vaihtoehtoinen decolorizing-reagenssia (ilman alkoholia): lisätään Hitaasti 250 mL rikkihappoa (vähintään 95%) 750 mL: aan tislattua vettä. Jäähdytä ja sekoita hyvin ennen käyttöä.
vastapaino: 0,3% netyleenisinistä., Liuotetaan 3 g netyleenisinistä 1 L tislattuun veteen.

Menettely Happo Nopeasti Tahra

1. Valmistaa ja korjata papa-näyte ennen värjäystä.
2. Aseta pieni kaistale blotting tai suodatinpaperin päälle näyte, ja aseta liu ’ uta yli kiehuvaa kuumaa vettä kylpy mesh pinta.
3. peitä suodatinpaperi ensisijaisella tahralla, karbolfuchsinilla. Jätä liukumäki vesihauteeseen 3-5 minuutiksi. Jatka tahran levittämistä, jos suodatinpaperi alkaa kuivua.,
4. Poista suodatinpaperi ja huuhtele dia vedellä, kunnes liuos on kirkasta.
5. Juokse happoalkoholin dekolorisaattoria liukumäen yli noin 10-15 sekuntia.
6. huuhtele liukumäki vedellä.
7. Peitä preparaatti toissijainen tai counterstain, metyleenisininen, 1 minuutti.
8. huuhtele liukumäki varovasti vedellä.
9. Blot the slide dry with bibulous paper.,

Tuloksen Tulkinta Happo Nopeasti Tahra

Acid fast: Kirkkaan punainen intensiivinen violetti, Punainen, suora tai hieman kaareva tangot, tapahtuu yksin tai pienissä ryhmissä, voi näkyä helmillä
Non-acid fast: Sininen väri; lisäksi tausta-aineistoa olisi tahra sininen.

Rajoitukset

1. suodatin paperi on edelleen kostea ja joutuessaan yksilö lämmityksen aikana, jotta asianmukainen tunkeutuminen ensisijainen tahra.,
2. Organisms cultivated on blood agar may experience nutrient deprivation, resulting in a lower lipid content in the outer membrane resulting in poor staining.

Examples

Acid-fast: Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium smegmatis.
Non-Mycobacterial bacteria: Nocardia
Coccidian Parasites: Cryptosporidium