Actualizat la data de 4 februarie 2021 de Sagar Aryal
Acesta este, de asemenea, stiu ca Ziehl-Neelsen pata.
obiectivul petei rapide acide
obiectivul principal al acestei pete este de a diferenția bacteriile în grupuri rapide acide și grupuri rapide neacide.,
principiul Acid rapid pata
acid rapid micobacteriile conțin acid micolic în membrana lor exterioară, ceea ce face celulele ceroase și rezistente la colorarea cu pete pe bază de apă, cum ar fi pata Gram. Pata primară, carbolfuchsin este aplicată celulelor, iar căldura și fenolul sunt utilizate pentru a permite petei să pătrundă în suprafața ceroasă a microorganismelor acide rapide. Excesul de pată este îndepărtat cu tratament cu alcool acid (etanol și acid clorhidric). O pată secundară, albastru de metilen, este apoi aplicată celulelor.,
Ziehl-Neelsen Pata Reactivi
Primar Pata: 0.3% Carbol-fuksinom. Se dizolvă 50 g fenol în 100 mL etanol (95%) sau metanol (95%). Se dizolvă 3 g de fuchsină bazică în amestec și se adaugă apă distilată pentru a aduce volumul la 1 L.
soluție de decolorare: se adaugă 30 mL acid clorhidric la 1 L de alcool denaturat 95%. Se răcește și se amestecă bine înainte de utilizare. Reactiv decolorant alternativ( fără alcool): adăugați încet 250 mL acid sulfuric (cel puțin 95%) la 750 mL apă distilată. Se răcește și se amestecă bine înainte de utilizare.
Counterstain: 0,3% albastru de netilenă., Se dizolvă 3 g albastru de netilenă în 1 L apă distilată.
procedura de acid rapid pata
- pregătiți și fixați frotiul specimenului înainte de colorare.
- puneți o fâșie mică de hârtie de filtru sau de filtru peste partea superioară a specimenului și așezați diapozitivul peste o baie de apă fierbinte fierbinte pe o suprafață de plasă.
- Acoperiți hârtia de filtru cu pata primară, carbolfuchsin. Lăsați diapozitivul pe baia de apă timp de 3 până la 5 minute. Continuați să aplicați pata dacă hârtia de filtru începe să se usuce.,
- scoateți hârtia de filtru și clătiți diapozitivul cu apă până când soluția se limpezește.
- rulați decoloratorul acid-alcool pe diapozitiv timp de aproximativ 10 până la 15 secunde.
- clătiți diapozitivul cu apă.
- acoperiți frotiul cu secundar sau contra-stain, albastru de metilen, timp de 1 minut.
- clătiți ușor diapozitivul cu apă.
- ștergeți diapozitivul uscat cu hârtie bibuloasă.,
Interpretarea rezultatelor de Acid Pata Rapid
Acidul rapid: Luminoase de culoare roșie intens violet, Rosu, drepte sau ușor curbate tije, care au loc individual sau în grupuri mici, pot apărea margele
Non-acid repede: Albastru culoare; În plus, material de fond ar trebui să pata de albastru.
Limitări
- hârtia De filtru trebuie să rămână umed și în contact cu modelul în timpul încălzirii pentru a permite o penetrare de primar pata.,
- Organisms cultivated on blood agar may experience nutrient deprivation, resulting in a lower lipid content in the outer membrane resulting in poor staining.
Examples
Acid-fast: Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium smegmatis.
Non-Mycobacterial bacteria: Nocardia
Coccidian Parasites: Cryptosporidium
Leave a Reply