O Plantă Alimente Dieta Bazata pe Modifică Serice de β-Sitosterol Concentrația în Hyperandrogenic Femeile aflate la menopauza

Abstract

steroli vegetali sau fitosterolii sunt componente comune de alimente vegetale, în special uleiuri vegetale, seminte si nuci, cereale și leguminoase. Cele mai frecvente fitosteroli sunt campesterolul, β-sitosterolul și stigmasterolul. Fitosterolii au proprietăți anticarcinogene., Studiile anterioare au sugerat că populațiile cu incidență scăzută a cancerului de sân consumă adesea diete bogate în fitosteroli. Studiul de față a evaluat dacă consumul unei diete pe bază de alimente vegetale, cu conținut scăzut de grăsimi animale, poate crește nivelurile serice de fitosterol la femeile aflate în postmenopauză. O sută patru femei voluntari au fost randomizate la intervenții dietetice sau grupuri de control. Intervenția dietetică a inclus consiliere dietetică intensivă pentru înlocuirea produselor de origine animală cu alimente pe bază de plante., Subiecții din grupul de intervenție dietetică au participat de două ori pe săptămână timp de 18 săptămâni la ateliere despre pregătirea și consumul unei diete pe bază de alimente vegetale. Modificarea absolută a concentrației serice totale de fitosterol a fost mai mare în grupul de intervenție dietetică decât în grupul de control. Modificarea procentuală a avut tendința de a diferi între grupuri (P = 0,06). Cu toate acestea, numai pentru β-sitosterol, modificările absolute și procentuale din cadrul unui grup diferă semnificativ între grupuri (P = 0, 0017)., Scăderea colesterolului total seric în grupul de intervenție dietetică (-14%) a fost mai mare decât cea din grupul de control (-4%; P = 0,0005). Rezultatele acestui studiu arată că nivelurile circulante de fitosteroli pot fi afectate de modificarea dietei. Aceste constatări indică faptul că fitosteroli, în special β-sitosterol, pot fi utilizate ca biomarkeri de expunere în studiile observaționale sau ca respectarea indicatorilor de alimentare studiile de intervenție de prevenire a cancerului.,sterolii vegetali sau fitosterolii sunt componente comune ale alimentelor vegetale, în special uleiurile vegetale, semințele și nucile, cerealele și leguminoasele (1). Cele mai frecvente fitosteroli sunt campesterolul, β-sitosterolul și stigmasterolul. Din punct de vedere structural, acești compuși sunt similari cu colesterolul, cu excepția unui lanț suplimentar de hidrocarburi în poziția C-24. Corpul uman nu sintetizează endogen fitosterolii. Fitosterolii circulanți sunt derivați exclusiv prin absorbția intestinală (2). Nivelurile serice de fitosterol la om variază între 7 și 41 µmol/L (2, 9 până la 17, 0 mg / L) (3).,fitosterolii pot avea proprietăți anticarcinogene. La concentrații de 16 µmol/L (6,7 mg/L), fitosterolii inhibă creșterea și induc apoptoza în celulele cancerului de prostată uman (4). În experimentele in vivo, șobolanii hrăniți cu o dietă suplimentată cu 0,3% β-sitosterol au avut o incidență mai mică a tumorilor induse chimic decât controalele (5). Awad și colab. (6) a observat că β-sitosterolul inhibă creșterea MBA-MD-231, o linie de cancer mamar uman., În plus, studii recente au indicat că hrănirea șoarecilor SCID (imunodeficienți combinați sever) o dietă suplimentată cu fitosteroli pentru 8 săptămâni inhibă creșterea cancerului de sân uman cu 33% și reduce metastazele cu 20% (7). Rezultate similare au fost obținute și utilizând celule PC3, o linie celulară de prostată umană (8).populațiile cu risc scăzut de cancer mamar consumă mai mulți fitosteroli alimentari decât cei cu risc ridicat. De exemplu, japonezii consumă o hrană pe bază de plante și o dietă cu conținut scăzut de grăsimi animale, bogată în fitosteroli. Concentrațiile lor de dietă variază între 8 și 12 µmol/L (3,4 până la 5,0 mg / L)., Japonezii au, de asemenea, o incidență scăzută a cancerului de sân (9,10). În schimb, populațiile cu incidență ridicată a cancerului de sân din țările occidentale, cum ar fi Statele Unite și Europa de Nord (inclusiv nordul Italiei), au un aport scăzut de legume și grăsimi, care sunt asociate cu fitosterol dietetic scăzut de 2-6 µmol/L (80-250 mg/d) (9-11). Astfel, aportul de fitosterol poate explica în parte efectul protector al unei diete bogate în legume asupra incidenței cancerului de sân care a fost observat în unele studii epidemiologice (12-13).,

scopul prezentului studiu a fost de a evalua efectul de dieta, și, în special, efectul unei plante alimentare bazate pe dieta saraca in grasimi animale, pe ser fitosterol niveluri în hyperandrogenic femei aflate în postmenopauză, care sunt caracterizate de un risc ridicat de cancer de san din cauza lor endocrine profil (14). Am emis ipoteza că un aliment pe bază de plante ar crește nivelurile serice de fitosteroli, în special campesterol și β-sitosterol, într-un eșantion convenabil de femei.

materiale și metode

Proiectarea studiului.,

datele pentru acest studiu au provenit dintr-un studiu randomizat controlat efectuat la Milano, Italia din noiembrie 1995 până în noiembrie 1996, studiul dieta și androgenii (DIANA)2 (15). Divizia de epidemiologie la Istituto Nazionale Tumori (Institutul Național Italian al cancerului), Milano, nordul Italiei a efectuat studiul DIANA pentru a evalua efectul unei diete pe bază de alimente vegetale, bogată în legume și fibre și săracă în grăsimi animale și carbohidrați rafinați, asupra hormonilor endogeni, în special androgeni serici, hormonii sexuali care leagă globulina și insulina., În octombrie 1995, am recrutat participanți prin ziare și reclame TV italiene pentru acest proces privind dieta și sănătatea femeilor din Milano (unul dintre cele mai mari orașe industriale din Italia)., Criteriile de eligibilitate au fost: 1) absența ciclurilor menstruale timp de cel puțin 2 ani înainte de includerea în studiu; 2) nici un curent sau anterior (ultimele 6 luni înainte de recrutare în studiu) tratamentul hormonal; 3) nici o istorie de ovariectomie bilaterală; 4) nici un istoric personal de cancer; 5) nici un curent aderarea la un vegetarian sau dieta macrobiotica sau la orice alt medical prescris dieta; și 6) nr actuale de tratament pentru diabet zaharat. Am recrutat un total de 312 femei., Toate femeile au furnizat consimțământul informat în scris, iar Comitetul științific și etic al Istituto Nazionale Tumori din Milano a aprobat studiul.

după post, probele de sânge ale participanților au fost colectate între 0700 și 0900 h. testosteronul seric a fost măsurat la toți cei 312 participanți. Am considerat un total de 104 femei în colțul din tertile de testosteron seric (testosteron 13.18 pmol/L) pentru a fi hyperandrogenic și selectate aceste femei pentru studiul de față, deoarece acestea sunt la un risc crescut pentru cancerul de san (14,16)., La hyperandrogenic femei au fost randomizați în nici o intervenție sau un grup de control (52 de femei fiecare), în blocuri de vârstă (deasupra sau sub 58 y, vârsta mediană), de prebaseline nivelurile de testosteron (clasificate în trei niveluri) și de prebaseline insulină (trei niveluri).Femeile randomizate la grupul de intervenție dietetică au fost instruite să urmeze dieta descrisă mai jos pentru 18 săptămâni, din februarie până în iunie 1996. Grupul de control a primit doar o recomandare generală de creștere a consumului de legume și fructe., La momentul inițial (ianuarie 1996) și la sfârșitul perioadei de intervenție (iunie 1996), probele de sânge prelevate după post și probele de urină 24-h au fost colectate între 0700 și 0900 h de la toți cei 104 participanți. Probele de ser și urină au fost depozitate la -80°C.

intervenția dietetică.femeile din grupul de intervenție dietetică au participat de două ori pe săptămână la ateliere despre cum să gătească cu legume în timpul perioadei de intervenție. Subiecții au pregătit și consumat mese de studiu în timpul fiecărui atelier.,o masă tipică a inclus fie o supă de legume, fie câteva legume proaspete, ocazional inclusiv alge marine, și un fel principal cu orez integral sau paste sau alte cereale integrale însoțite de leguminoase, legume crucifere, alte legume fierte sau pește. Am sfătuit femeile să consume cel puțin o porție de produs din soia în fiecare zi, de exemplu, fasole, tofu, tempeh, lapte de soia sau miso., S-a pus accentul pe prepararea dulciurilor și prăjiturilor cu stafide, suc de fructe sau orez fermentat natural sau malț de orz în loc de zahăr, cu semințe de in sau alte semințe în loc de unt și cu lapte de soia în loc de lapte de vacă. Femeile au fost, de asemenea, instruite cu privire la modul de a înlocui sursele vegetale bogate în proteine și calciu pentru carne, ouă și produse lactate (fiecare să fie consumat nu mai mult de o dată pe săptămână)., În plus, participanții au fost rugați să evite carbohidrații rafinați (zaharoză, pâine albă și produse de patiserie pe bază de făină rafinată) și să limiteze sarea, dar au fost încurajați să condimenteze alimentele cu ulei de măsline nerafinat și diverse semințe (în loc de grăsimi lactate) și să consume pește. În fiecare săptămână, participanții au primit o pâine de 1 kg de pâine făcută cu grâu integral și 8% semințe de in (jumătate semințe întregi, jumătate măcinate), ocazional amestecate cu ovăz sau secară. Subiecții au consumat această dietă ad libitum și nu au fost sfătuiți să reducă aportul alimentar (Tabelul 1).

evaluarea aportului alimentar.,

înainte de randomizare, participanții au completat un chestionar de frecvență alimentară dezvoltat pentru studiul european prospectiv Investigation in Cancer and Nutrition (EPIC) (17). Pentru a monitoriza respectarea recomandărilor dietetice, participanții au înregistrat frecvența consumului de alimente selectate în jurnalele 24-H. Femeile din grupul de intervenție dietetică au completat jurnalele 1-d de 24 de ori, iar femeile din grupul de control, de 10 ori., Am estimat aportul mediu absolut de nutrienți și energie în cele două grupuri pe baza a cinci rechemări dietetice 24-h asistate de calculator efectuate în timpul săptămânii 11-16 a studiului folosind software dezvoltat pentru studiul EPIC (17). Sistemul utilizează baza de date Italiană privind compoziția alimentelor (18). Înălțimea și greutatea participanților au fost măsurate la începutul și la sfârșitul studiului.

conformitatea studiului.cincizeci din cele 52 de femei din grupul de intervenție dietetică au finalizat programul. Două femei au terminat doar aproximativ jumătate din program., În general, doar cinci femei au lipsit de mai mult de cinci ori din cele 36 de ateliere și nu au mâncat mesele pregătite. Am exclus două femei din grupul de control, deoarece nu au avut un examen de urmărire. În plus, trei femei din grupul de control nu au avut suficient ser pentru determinările fitosterolului. Prin urmare, acest studiu a inclus date de la 99 de femei: 52 în intervenția dietetică și 47 în grupul de control.

analize de laborator.

pentru fiecare duplicat sau probă, s-a utilizat 0,5 mL ser., 5-α-Cholestane (10 µg; Sigma Chimice, St Louis, MO) a fost adăugat în toate repetiții și probe ca standard intern, urmată de saponificare cu 1 mol/L etanolică de KOH și încălzire la 80°C timp de 1 h. Steroli au fost extrase cu hexan. GC a fost utilizat pentru a examina sterolii fără derivatizare. GC a fost echipat cu o coloană capilară de 0,9 m (model EC-5; Alltech, Deerfield, IL), iar temperaturile au fost menținute la 265°C și 300°C pentru cuptor și, respectiv, portul de injecție. Azotul a fost utilizat ca gaz purtător., Identificarea vârfurilor a fost realizată utilizând timpii de retenție AI standardelor sterolice autentice (Sigma Chemical). Zonele de sub vârfuri au fost integrate și corectate pentru recuperarea și răspunsul GC la diferiți steroli folosind standardul intern. Colesterolul seric a fost măsurat utilizând un calibrator de colesterol certificat (Sigma Chemical). Toate determinările au fost efectuate în două exemplare.,

probele de la același subiect (inițial și după finalizarea intervenției) atât din grupurile de intervenție, cât și din cele de control au fost analizate împreună de un tehnician de laborator care nu știa de tratament. Astfel, pentru că într-rula de precizie este o sursă importantă de performantele tehnice, aceasta a fost evaluată prin analiza neetichetate duplicate (de la single probe clinice colectate de la subiecți) plasate la începutul, la mijlocul și la sfârșitul fiecărui laborator., Tehnice variabilitatea a fost exprimat ca intraclasa coeficientul de corelație (ICC), o corelație indicele care a luat în considerare atât intra – și interassay variabilitatea testelor analitice. CPI pentru β-sitosterol a fost 0,88 (0,63, limita inferioară) și pentru campesterol 0,57 (0,15, limita inferioară).anterior, am evaluat variabilitatea intraindividuală a β-sitosterolului și campesterolului într-un studiu realizat la Departamentul de Medicină Socială și preventivă în 1998 (20). Șapte femei sănătoase premenopauzale au fost recrutate din personalul Departamentului., Pe o perioadă de 6 luni, fiecare femeie o dată pe lună după post a furnizat o probă de sânge în același moment al zilei și în aceeași zi numerică a ciclului menstrual. Serul a fost prelucrat imediat după prelevarea de sânge și depozitat la -80°C. Toate probele de ser de la același individ au fost prelucrate în același timp de același tehnician la sfârșitul perioadei de 16 luni. Variabilitatea intraindividuală suplimentară pentru campesterol și β-sitosterol, exprimată ca ICC, a fost de 0,58 (0,31 limită inferioară), respectiv de 0,91 (0,49 limită inferioară). Aceste constatări au indicat o fiabilitate bună până la echitabilă a acestor determinări.,

analiză statistică.

analiza statistică s-a concentrat pe modificările concentrațiilor plasmatice de β-sitosterol și campesterol, calculate ca diferență între nivelurile inițiale și cele de sfârșit de studiu. Înseamnă schimbări în dietă din grupul de intervenńie au fost comparate cu cele din controale de neparametrice de analiză, Wilcoxon rank sum test (α < 0.005). Concentrațiile serice de fitosterol și greutățile corporale au fost comparate statistic utilizând testul T al elevului. SAS versiunea 8.2 a fost utilizată pentru analiza statistică.,

REZULTATE

La obiceiurile alimentare de participante femei înainte de randomizare, estimată de chestionar de frecvență alimentară, a arătat un tipic din Nordul italiei dietetice model, cu 42% din energie din carbohidrati (în principal din pâine și paste făinoase) și 37% din grăsimi (în principal din carne, produse lactate și ulei de măsline) (Tabelul 1).după cum sa raportat în alte studii de rechemare a dietei (21), interviurile efectuate din 11-16 wk ale acestui studiu au subestimat ușor aportul total de energie în ceea ce privește necesarul de energie (21)., Cu toate acestea, datele au arătat un aport total de energie mai mic în grupul de intervenție decât în grupul de control, o medie de 250 kcal/d (1045 kJ/d) (P < 0, 004), în principal datorită aportului mai mic de grăsimi totale și saturate. Aceste rezultate indică faptul că aportul de energie al subiecților a fost mai mic decât cerințele de energie publicate pentru populația italiană a femeilor aflate în postmenopauză.,

în Funcție de frecvență alimentară jurnale compilate în timpul studiului, grupul de intervenție consumat carne sau produse din carne de două ori pe săptămână, comparativ cu o dată pe zi în grupul de control, dar consumă pește de mai multe ori (de 3 ori/săpt față de 1,5 în control). Consumul de lapte și brânză a fost redus la jumătate (0, 4 față de 1, 0 porții/zi), iar untul a fost practic eliminat. Un produs din soia a fost consumat de grupul de testare în medie de 1, 7 ori/d; semințele de in, fie în pâine, fie în prăjituri, fie ca atare, au fost consumate în fiecare zi (aproximativ 8 g/d), iar algele au fost consumate în fiecare zi ca ingrediente ale diferitelor feluri de mâncare., Grupul de control rar, dacă vreodată, a consumat oricare dintre aceste produse alimentare. Grupul de intervenție a consumat, de asemenea, următoarele mult mai des decât controalele: orez integral sau alte cereale integrale sau produse din cereale integrale (2,5 față de 0,5 ori/d), nuci, migdale, susan și alte semințe (1,2 față de 0,05 ori/d), leguminoase (0,5 față de 0,1 ori/d), legume crucifere (0,8 față de 0,1 ori/ Alte legume și fructe au fost consumate aproape la fel de frecvent de grupul de control ca și de grupul de Intervenție (2, 2 și, respectiv, 2, 3 ori/zi).,modificarea absolută a concentrațiilor plasmatice totale de fitosterol a fost mai mare în grupul de intervenție dietetică decât în grupul de control (Tabelul 2). Modificarea procentuală a avut tendința de a diferi (P = 0, 06). Cu toate acestea, numai pentru β-sitosterol, modificările absolute și procentuale din cadrul unui grup diferă semnificativ între grupuri (P = 0, 0017). S-au repetat analizele de ajustare a concentrațiilor serice de campesterol, β-sitosterol și fitosteroli totali, iar rezultatele nu au fost diferite de estimările neajustate (datele nu sunt prezentate)., De asemenea, am ajustat analizele pentru IMC, raportul talie-șold și colesterol la momentul inițial, iar rezultatele nu au fost diferite de rezultatele neajustate (datele nu sunt prezentate). Nivelurile totale de colesterol au scăzut mai mult în grupul de intervenție (-14%) decât în grupul de control (-4%; P = 0, 0005). Grupul de interventie a pierdut mai mult în greutate (P < 0.0001) decât grupul de control: 4.06 kg (interval, -0.6–8.8 kg) versus 0.54 kg (interval, +2.2–5.3 kg).,principala constatare a acestei intervenții dietetice caracterizată printr–o dietă bazată pe alimente vegetale la femeile aflate în postmenopauză hiperandrogenică a fost o modificare mai mare a nivelurilor serice de β-sitosterol comparativ cu grupul de control; cu toate acestea, acest lucru nu a fost observat pentru campesterol sau fitosteroli totali.deși există dovezi că fitosterolii pot avea proprietăți anticarcinogene (22), mecanismul prin care inhibă creșterea tumorii nu este cunoscut., Cu toate acestea, anchetatorii au emis ipoteza că fitosterolii pot influența dezvoltarea cancerului prin modificarea căilor de semnalizare celulară, în special ciclul sfingomielinei (SM) (4,23). Activarea acestei căi de către mai mulți agoniști inhibă creșterea (25) și influențează alte câteva procese, cum ar fi diferențierea (25), interacțiunea celulă-celulă (25) și apoptoza celulelor tumorale (23,26). Încorporarea fitosterolilor într-o linie de celule canceroase umane reduce SM membrana, sugerând o activare a ciclului SM (27).,în ciuda dovezilor experimentale și ecologice pentru rolul fitosterolilor în protecția împotriva cancerului de sân, nu există suficiente informații care să descrie influența dietei asupra nivelurilor serice de fitosterol și cum, la rândul lor, fitosterolii ar putea influența riscul de cancer mamar. Există două studii publicate privind fitosterolii serici în legătură cu cancerul de sân la om., În primul, efectuat pe 10 femei cu boală benignă de sân și 11 pacienți cu cancer de sân, concentrațiile de fitosterol în țesutul adipos (campesterol, stigmasterol și β-sitosterol) au fost mai mici în cazurile de cancer de sân decât în controalele, deși diferențele nu au fost semnificative (28). În cel de-al doilea studiu pe 11 femei sănătoase, 7 femei care alăptează și 14 femei diagnosticate cu cancer de sân, nivelurile serice de fitosterol nu au diferit între grupuri (29). Cu toate acestea, aceste studii au avut limitări majore din cauza valabilității interne scăzute (de exemplu,,, lipsa informațiilor privind comparabilitatea cazurilor și controalelor, lipsa controlului variabilității tehnice și biologice a fitosterolilor pentru cazuri și controale) și a dimensiunii mici a eșantionului. Mai mult, niciunul dintre studii nu a inclus informații dietetice.

s-a observat că nivelul seric de fitosteroli din participanții la acest studiu au variat de la 22 la 27 µmol/L (9.1 la 11,2 mg/L), care este similar cu 7-41 µmol/L gama (2.9–17,0 mg/L) a constatat în studiile anterioare efectuate pe persoane normale (3,31)., În grupul de intervenție, β-sitosterolul a crescut cu 20% datorită aportului de nuci, semințe și soia în dietă (1,31). În acest studiu am observat o variabilitate mai mare a campesterolului seric comparativ cu β-sitosterolul., Acest lucru poate reflecta: 1) variația concentrațiilor acestor fitosteroli în diferite legume și alimente vegetale consumate (1,30); 2) diferențele de absorbție a acestora și a ratei de eliminare din organism (9,30); 3) puțin mai mari performantele tehnice în studiul nostru pentru campesterol în comparație cu β-sitosterol; și 4) mai mari variabilității intraindividuale pentru campesterol în prealabil efectuat de fiabilitate studiu (20).,în concluzie, studiul de față susține ipoteza că o dietă pe bază de plante bogată în fibre de cereale, soia și semințe de in poate crește nivelurile circulante de β-sitosterol. Aceste constatări indică faptul că fitosterolii pot fi utilizați ca biomarkeri ai expunerii în studiile observaționale sau ca indicatori de conformitate în studiile de intervenție dietetică privind prevenirea cancerului.

autorii mulțumesc personalului de la Asociația „Attive come prima”, unde a fost efectuată munca de teren. De asemenea, mulțumim lui A. Burrone, S. Gastaldi, C. Gazzola și A., Ricciuti pentru ajutor în organizarea logistică a proiectului DIANA și pentru toate femeile participante.

LITERATURA CITATĂ

Abrevieri

• DIANA

  dieta si androgeni studiu

• EPIC

  perspective Europene Anchetă în Cancer și de Nutriție Studiu

• ICC

  intraclasa coeficientul de corelație

• SM

  sfingomielina.,

Note