PMC (Čeština)

Hlavní Text

Kongenitální generalizovaná hypertrichóza (CGH) je geneticky a fenotypově heterogenní skupinu vzácných onemocnění, vyznačující se tím, že univerzální přerůstání vlasy. Je to hlavní fenotypový rys mnoha odlišných genetických syndromů a může být zděděn jako autosomální nebo X-spojený dominantní rys.,1-5 fenotyp CGH vyvolal velký vědecký zájem a pozornost médií, především kvůli nápadnému chlupatému fenotypu a jeho zjevně atavistické povaze.6,7 dosud byly genetické defekty nalezeny ve dvou formách autozomálně dominantního CGH. Autosomálně dominantní vrozená generalizovaná hypertrichóza terminalis s nebo bez gingivální hyperplazie (MIM 135400) je spojena s copy-počet variací (CNVs), a to buď microdeletions nebo microduplication, na chromozomu 17q24 v obou familiární a sporadické případy.,U hypertrichózy universalis congenita, typu Ambras (MIM 145701) bylo zjištěno 5 přeskupení chromozomu 8 a možný poziční účinek.8 Figuera et al. mapovány první CGH lokusu na chromozomu Xq24-dotaz č. 27.1 v roce 1995 ve velké Mexické rodiny oddělování X-vázaná hypertrichóza (MIM 307150).3 Následně, genetické mapování byla potvrzena v Mexickém spřízněné s X-spojený vrozená hypertrichóza syndrom sestávající z CGH, hluchota, a zubní anomálie.4 základní mutace však zůstává neidentifikovaná.,

Genomické poruchy jsou rostoucí třídy lidských poruch, které jsou způsobeny genomové přestavby, které by mohly vést k úplné ztrátě nebo zisku gen(y), citlivé dávkování účinku, nebo, alternativně, může narušit strukturální integritu gen.9 Mikrodelecí a mikroduplikací je nejčastěji spojováno s lidskými genomickými poruchami.,9-11 Jiný typ genomové přestavby, vidět méně často, je interchromosomal vložení tam, kde je interkalace části jednoho chromozomu na jiný, nehomologní chromozomu a je také odkazoval se na jako interchromosomal inzerční translokace.12,

Nedávné aplikace masivně paralelní sekvenování (MPS) a vysokým rozlišením genomu-široký CNV analýzy se rychle odhalili genetický základ mnoha vzácných Mendelistická a genomické poruchy.,10-14 Zde, přidáme X-vázaná vrozená hypertrichóza syndrom, mezi nejvzácnější vzácných podmínek, aby seznam těchto poruch, hlášení o identifikaci nezávislých interchromosomal vložení zahrnující různé autosomálně segmenty zprostředkované stejné malé palindrom na Xq27.1 v každé ze dvou X-vázaných CGH rodin z různých etnických prostředí.

Nejprve jsme zjistili pět generací čínské rodiny s odlišným syndromem CGH, skoliózy a spina bifida (obrázky 1A a 1B). Rodina měla 11 postižených jedinců (obrázek 1a)., Všechny čtyři postižených mužů k dispozici pro fenotypové hodnocení měl těžkou hypertrichóza spojené s skoliózy, vzhledem k tomu, že všechny postižené ženy měl jen mírné hypertrichóza, která byla v souladu s X-vázanou dědičnost (Obrázky 1B–1D). Proband, 41letý muž, měl také spina bifida prezentující se jako cervikální a sakrální meningoceles (obrázek 1C). Dalších deset postižených jedinců nevykazovalo spina bifida., Shromáždili jsme vzorky krve z 19 zúčastněných členů rodiny (osm postižených, sedm nedotčena, a čtyři manželů) po získání informovaného souhlasu od účastníků a schválení od Pekingu Union Medical College institucionální review board. Odběr vzorků choriových klků byl proveden pro účastníka v1 (obrázek 1a). Genomická DNA byla extrahována standardními metodami., K určení, zda je X-vázaná vrozená hypertrichóza syndrom mapovány na stejné místo jako bylo oznámeno dříve, v Mexické CGH rodina,3 jsme stanovili genotypy v 17 členy rodiny na 14 polymorfních mikrosatelitů marker loci z Xq26.3-dotaz č. 27.2 region (Tabulka S1, dostupná on-line), 11 které byly navrženy s použitím Lidského Genomu UCSC Browser. Dvoubodová analýza vazeb a výpočet LOD skóre byly provedeny s programem MLINK softwaru LINKAGE package (verze 5.2)., Parametry, které se používají v vazebné analýzy byly X-vázaná dominantní dědičnost, s kompletní penetrancí mutace nulovou sazbou, rovné mikrosatelitů-alely, a nemoc-alely frekvence 1 z 10 000. Naše dvoubodové propojení analýzy produkoval maximální LOD skóre 3.91 na θ = 0 pro pět markerů (Tabulka S2), potvrzení genetické vazby na stejné místo v Čínské rodiny. Na základě haplotypů jsme pozorovali dvě rekombinační události, jednu v III5 a druhou v IV2 (obrázek S1)., Další haplotyp analýzy v těchto dvou rekombinací vymezené kritické oblasti, aby interval mezi ZLS3 a ZLS10, což představuje genomické intervalu 5,6 Mb obsahující 40 RefSeq genů (Obrázek 1E a Obrázek S1). Provedli jsme PCR amplifikace a sekvenování všech exonů a jejich doprovodných intronic sekvencí těchto genů u probanda (Obrázek 1E; primer informací je k dispozici na vyžádání), ale nebyly zjištěny žádné patogenní mutace.,

Fenotypy a Genetické Lokusu Výraznou X-vázaná Vrozená Hypertrichóza Syndrom

(A) Rodokmen pět-generace Čínské rodiny s jedenácti postižených jedinců. Pro v1 byla diagnóza provedena ze vzorku choriových klků. Jedinci, jejichž DNA byla k dispozici, jsou označeni“+.“

(B) fotografie probandu ukazující závažné CGH.

(C) fotografie a MRI obraz ukazující cervikální meningocele v probandu.

(D) rentgenový obraz probandu zobrazující skoliózu.

(E) schéma Xq26.,3-q27.2 zobrazující geny RefSeq v kritické oblasti pro syndrom vrozené hypertrichózy spojený s X. Pevná modrá lišta představuje kritickou oblast. Jsou zobrazeny pozice všech genetických markerů používaných v analýze vazeb.

určit, zda je X-vázaná vrozená hypertrichóza syndromu byla způsobena neznámým microdeletion nebo microduplication, provedli jsme genomu-široký vysokým rozlišením CNV skenování ve čtyřech postižených jedinců (dvou mužů a dvou žen), pomocí Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array 6.,0, obsahující více než 906,600 Snp a přes 946,000 kopírování-číslo sondy. Genomová DNA vzorků od čtyř postižených jedinců (dvou mužů, II9 a III5; a dvě ženy, III3 a IV2) genotyp na CapitalBio Corporation (Peking, Čína) s SNP Array 6.0 v souladu s návodem výrobce protokoly. Genotypové volání, kontrola kvality genotypů a identifikace CNV byly provedeny pomocí softwaru Affymetrix Genotyping Console 3.0. Volání typu Copy-number-state byla stanovena pomocí Kanárského algoritmu vloženého do balíčku Affymetrix Genotyping Console 3.0., Jsme neměli odhalit potenciální patogenní CNVs v kritické oblasti, ale našel >121 kb microduplication z COL23A1 locus na 5q35.3 (CN_143030 na CN_1143071) ve všech čtyřech jedinců (Obrázek 2A).

Identifikace Dědičné Interchromosomal Vložení na Xq27.1 v Čínské Rodině s Výraznou X-vázaná Vrozená Hypertrichóza Syndrom

(A) Kopírování-číslo stav 600 kb genomické oblasti na chromozomu 5q35.3 ukazuje přítomnost microduplication v probanda. CN, číslo kopie.,

(B) validace mikroduplikace a její segregace s fenotypem choroby qPCR. RCN, relativní číslo kopie. Chybové pruhy představují SD.

(C a D), Dvě barevné RYBY signály na reprezentativním interfázní jádro (C) a typické metafáze chromozomů (D) prokázání, vložení události. Bac sondy jsou CTD-2507i18 (červená), RP11-55E17 (zelená) a RP11-671F22 (zelená). Viz obrázek 4A pro pozice klonů BAC.

(E A F) sekvenční analýza proximálních (E) a distálních (F) vstupních křižovatek. Referenční sekvence na Xq27. 1 a 5q35.,3 jsou označeny červeně a modře. Proximální křižovatka obsahuje mikroinzerci z chromozomu X (černá) a 2 bp mikroinzerci (zelená) neznámého původu.

(G) PCR amplifikace distální inserční křižovatky ukazující segregaci vložení s fenotypem.

všechny genomické pozice odpovídají lidské referenční sekvenci z února 2009 (GRCh37).

potvrdit genomové duplikace 5q35.3 regionu, navrhli jsme primery pro real-time kvantitativní PCR (qPCR) testu pomocí Primer Express v2.,0 software (aplikované biosystémy). Provedli jsme qPCR, jak bylo popsáno výše.15 relativní číslo kopie (RCN) cílových sekvencí bylo určeno srovnávací metodou ΔΔCT. Pro duplikaci byl použit 1,5 násobný RCN. Pokusy qPCR se opakovaly třikrát. Primery používané pro testy qPCR jsou uvedeny v tabulce s1. Naše qPCR assay potvrdil microduplication a také ukázal, plnou segregaci microduplication s nemocí fenotyp v rodině (Obrázek 2B), což naznačuje možné interchromosomal vložení události do kritické oblasti.,

provedli Jsme dva-barva interfáze a mitózy fluorescenční in situ hybridizace (FISH) k potvrzení vložení do Čínské rodiny. Bakteriální umělé chromozómu (BAC) klony CTD-2507I18, RP11-55E17, a RP11-671F22 byly vybrány k pokrytí duplicitní regionu COL23A1 (MIM 610043) na 5q35.3, FHL1 (MIM 300163) na Xq26.3, a F8 (MIM 300841) na Xq28, respektive (Obrázek 4A). Na RP11-55E17 a RP11-671F22 BAC DNA vzorky byly individuálně značené SpectrumGreen-dUTP (Abbott Molecular) a CTD-2507I18 DNA byl označen pomocí Cy3-dUTP (GE Healthcare Life Sciences)., Na interfázní jádra a metafáze chromozómy byly cohybridized s párem SpectrumGreen-dUTP-označené referenční sondy (zelený signál) a Cy3-dUTP-označené zkušební sonda (červená) signál, s kontrastním DAPI, a vizualizován pomocí fluorescenční mikroskopie., Dvou-barevné RYBY signálu vzory pozorované na obou interfázního jádra (Obrázek 2C) a metafáze chromozomy (Obrázek 2D a Obrázek S2) byly v souladu s interchromosomal vložení události, jak je uvedeno na přítomnost červené signály pro COL23A1 na chromozomu 5 homologů a na X chromozomu mezi zelené signály odpovídající FHL1 na X26.3 a F8 na Xq28 (Obrázek 2D a Obrázek S2).,

Interchromosomal Inzerce Zprostředkované Stejný Člověk-Konkrétní Palindrom

(A) Schematický diagram zobrazující dva nezávislé vložení nalézt v této studii. Červené pevné tyče představují Vložené fragmenty a uvedené velikosti odpovídají dvojicím bází (bp). Červené čáry zobrazují orientaci vložení. Jsou zobrazeny polohy sond BAC používaných u dvoubarevných ryb a genů RefSeq v odpovídajících chromozomálních oblastech.,

(B) schematický diagram 180 bp palindromu specifického pro člověka se shrnutím bodů zlomu zjištěných v této studii. Pevné trojúhelníky označují vkládací body ve dvou studijních rodinách (čínsky červeně a Mexicky zeleně). JBPcn, křižovatka breakpoint v čínské rodině; JBPmx, křižovatka breakpoint v mexické rodině. Otevřené trojúhelníky představují body vymazání u normálních jedinců (Čínština v červené, Mexická v zelené a Yoruban v černé barvě). Černá pevná tyč představuje prvek LINE-1, který obsahuje proximální JBPcn., Přesná poloha JBPcn je uvedena.

(C) schematické schéma znázorňující malý palindrom specifický pro člověka na Xq27. 1 a jeho doprovodné sekvence. Palindromická sekvence 180 bp je zabalena. Šimpanz má dvě poloviny palindromu, ale v přímé orientaci. Všichni ostatní tři nelidští primáti mají pouze jednu polovinu palindromu.

všechny genomické pozice odpovídají lidské referenční sekvenci z února 2009 (GRCh37).,

paralelně s výše popsaných CNV a RYBY analýzy jsme provedli cílené zachytit a POSLANCI v probanda pomocí Roche NimbleGen SeqCap a 454 Sekvenování technologií. Dvě vlastní Sekvence Zachytit 385K lidské pole byly poprvé navrženy a vyrobeny v Roche NimbleGen, každý s 385,000 unikátní SeqCap sondy, jak určí SSAHA algoritmus, zahrnující 88.1% cílené kritické oblasti mezi ZLS3 a ZLS10 (chrX: 135,204,482–140,853,096; GRCh37, hg19) (Obr. 1E)., Zachycená DNA byla sekvenována na systému sekvenceru genomu FLX s chemií řady GS FLX Titanium na Roche 454 Life Sciences. Výsledná sekvence čte byly mapovány do hg18 lidské odkaz s GS Reference Mapper software a činil 555 Mb sekvence dat s asi 98% mapovaných zpět do cílové oblasti. Další analýza s 454 GS Reference Mapper software odhalilo distální vložení uzlu sekvence (Obrázek S3), určující bod přerušení uvnitř chromozomu X (chrX: 139,502,951), do centra a 180 bp krátké palindromické sekvence na Xq27.,1, který se nachází 82 kb za SOX3 (MIM 313430) (obrázek S2, obrázky 4A a 4B). Pro zesílení vkládacích spojů jsme použili PCR s dlouhým dosahem. Primery byly navrženy ze sekvencí lemujících palindrom na Xq27. 1 a body zlomu na základě genomických souřadnic SNP pole 6.0., Sekvenční analýze výsledných amplikonů pomocí Sangerova sekvenování ověřována distální křižovatky nacházejí v cílené genomové sekvenování (Obrázek 2F), se umístil na druhém chromozomu X zarážku tvoří proximální vložení křižovatce uprostřed ČÁRU-1 prvek vedle malé palindrom (Obrázek 2E a Obrázek 4B), a uvedla, že mutovaný chromozom X má přímé vložení 125,577 bp fragmentu zevnitř COL23A1 (Obr. 2E a 2F, Obrázek 4A), tj. der(X)dir ins(X;5)(dotaz č. 27.1;q35.3)., Ukázalo se, že k tomuto vložení došlo současně s delecí 1263 bp mezi dvěma body zlomu chromozomu X na Xq27.1 (Obrázky 2E a 2F). V souladu s testem qPCR ukázal náš test junction PCR v rodině specifické fragmenty očekávaných velikostí u všech postižených jedinců, ale u žádného z neovlivněných rodinných příslušníků (obrázek 2G).

objev vložení zprostředkované krátké palindromatické sekvence v Čínské rodiny vyzváni, abychom prozkoumali, původně hlásil, X-vázaná Mexické CGH rodina (Obrázek 3A). Použití SNP pole 6.,0 pro posuzování čtyři členy rodiny (dva postižené a dva nedotčena) pro CNVs odhalila microduplication >278 kb fragment na 4q31 (SNP_A-2053483 na SNP_A-1883747), zahrnující PRMT10 a TMEM184C a zahrnující části ARHGAP10 (MIM 609746) a EDNRA (MIM 131243), v postižené členy (Obrázek 3B a Obrázek 4A). Tuto mikroduplikaci jsme ověřili testem qPCR (obrázek 3C) a získali jsme informace o bodu zlomu pomocí podobného přístupu junction PCR (obrázky 3D a 3E)., Naše výsledky naznačují, že postižených členů Mexické rodiny zdědil mutant X chromozom s obráceným vložením 300,036 bp fragment z 4q31.22-q31.23 regionu (Obrázky, 3D a 3E, Obrázek 4A), tj. der(X)inv ins(X;4)(dotaz č. 27.1;q31.23q31.22). Vyšetření všech dostupných členů rodiny pro vkládání s použitím spojovací PCR test potvrdil, segregace inzerční akce s CGH fenotyp (Obrázek 3F)., Velmi zajímavé je, že oba dva X zarážky identifikovány v Mexické rodiny byly ve středu palindrom (chrX: 139,502,951 a 139,502,958) (Obrázky 3D a 3E, Obrázek 4B), tedy posílení role této malé palindrom jako prostředník v zahájení dvou vložení zjištěných v této studii.

Identifikace Dědičné Interchromosomal Vložení na Xq27.1 v Mexické Rodiny s X-Spojený CGH

(A) Rodokmen pět-generace Mexické rodiny s X-spojený CGH., Jedinci, jejichž DNA byla k dispozici, jsou označeni“+.“

(B) stav kopírovacího čísla genomické oblasti 600 kb na chromozomu 4q31 ukazující přítomnost mikroduplikace u postiženého jedince. CN, číslo kopie.

(C) validace mikroduplikace pomocí qPCR. RCN, relativní číslo kopie. Chybové pruhy představují SD.

(D A E) sekvenční analýza proximálních (D) a distálních (E) vstupních křižovatek. Referenční sekvence na Xq27.1 a 4q31 jsou označeny červeně a modře. Distální křižovatka obsahuje mikroinzerci 25 bp.,

(F) PCR amplifikace proximální inserční křižovatky ukazující segregaci vložení s fenotypem.

všechny genomické pozice odpovídají lidské referenční sekvenci z února 2009 (GRCh37).

vybrali Jsme nezávislý inzerce zprostředkované stejné malé palindrom na Xq27.1 ve dvou různých rodin postižených s X-spojený hypertrichóza. Kromě toho úplná segregace těchto vložek s fenotypy poskytla další podpůrné důkazy o jejich příčinné úloze., Určit, zda tyto vložky byly jedinečné pro tyto rodiny a vyloučit možnost jejich zastupující normální genomické variace v populaci, jsme zjišťovali 740 mužské kontrolních jedinců (215 Čínské, 118 Mexické, a 407 Asijské Indické) pomocí PCR s použitím primerů odvozených ze sekvence lemující palindrom (Tabulka č. 1), a nenašli jsme žádné zjistitelné vložení., Kromě toho, CNVs zahrnující dvě identifikovat vložené segmenty nejsou hlášeny ve veřejné Databáze Genomových Variant a nejsou přítomny v 1274 Čínské kontrolních jedinců (1074 ze Šanghaje a 200 z Hong Kongu). Celkově vzato, naše výsledky naznačují, že palindrom-zprostředkované inzerce jsou základní příčinou pro izolované a syndromový X-vázaná CGH.

palindromické sekvence nejsou stabilní a mohou vyvolat genomické přeskupení, včetně delecí a rekurentních translokací.16-18 palindromická sekvence 180 bp je přítomna pouze u lidí., Je lemován opakováním linky 1 a sekvencí LTR (obrázek 4C). Vyšetření orthologní oblasti v genomu šimpanze odhaluje dvě poloviny palindromu, ale jsou v přímé orientaci a jsou odděleny sekvencí LTR. Dalších primátů, včetně orangutan, makak rhesus, a kosman, mají jen jednu polovinu palindrom (Obrázek 4C). Tyto výsledky naznačují, že palindrom je evolučně velmi mladý., Výše uvedené PCR analýza v kontrole jednotlivce, nicméně, detekovat delece o velikosti v rozmezí od 173 bp 9104 bp v devět osob (dvě Čínské, dva Mexické, a pět Asijských Indický) (Tabulka S3). Kromě toho byla delece 209 bp patrná u Jorubanského jedince podrobeného sekvenování celého genomu.19 znatelně, všech těchto deset delecí mělo jeden bod zlomu ve středu palindromu (tabulka S3), čímž se odstranila jedna polovina palindromu. Zdá se tedy, že palindromická sekvence specifická pro člověka na Xq27.,1 je náchylný k rozbití, a proto představuje hotspot pro genomické přeskupení, včetně vložení.

interchromosomal vložení akce vyžaduje alespoň tři rozbití akcí, a proto je nejen vzácnější, ale také složitější ve srovnání s běžnými typy genových přestaveb (microdeletion, microduplication, a terminál translokace). Dřívější studie mikroskopicky viditelných interchromozomálních inzercí odhadly výskyt na 1: 80 000 živých porodů.,20 Nicméně, v poslední době, high-rozlišení array-based comparative genomic hybridization (aCGH) analýzu a konfirmační FISH 18.000 klinických vzorků identifikovat 40 interchromosomal inzerce (1:500), což naznačuje, že nemusí být tak vzácné, jak se dříve myslelo.12 Interchromozomální inserce mohou vyvolat fenotyp onemocnění změnou aktivity genu. Pokud je Gen(Y) uvnitř vložení citlivý na dávkování, může být jeho exprese zvýšena. Událost vložení může narušit gen a způsobit ztrátu nebo zisk funkce., Aberantní exprese genu může vést od vložení nové sekvence uvnitř nebo v blízkosti genů, protože buď pozice efekt nebo zavedení nových regulačních sekvencí. Ve spontánní Tanečnice (Dc) myš mutantní, interchromosomal vložení v první intron z Tbx10 z genomické fragment obsahující p23 pořadatel může způsobit mimoděložní Tbx10 výrazu, čímž vzniká rozštěp rtu a deska u homozygotů.,21 Díky kombinaci high-rozlišení microarray-based CNV skenování a cílené genomové sekvenování, jsme byli schopni najít nezávislé patogenní inzerce v X-vázaná CGH. Obě vložení události se ukázaly být zprostředkován stejné malé palindrom, který se nachází v 485 kb gen-pouštní oblasti lemovaný telomerically tím, SOX3 kódování SRY (sex určení region Y)-box 3 transkripční faktor (Obrázek 4A)., SOX3 je nejzajímavější kandidát gen, protože jeho 3′ konci leží 82 kb telomerické k palindrom a SOX rodiny transkripčních faktorů patří mezi nejdůležitější skupiny vývojových regulačních orgánů. Předpokládáme, že palindrom-zprostředkované inzerce identifikovány v naší současné studie může mít zaveden tkáňově specifické regulační prvky a tím vyvolané ektopickou expresi SOX3 v vlasových folikulů (HFs) nebo prekurzorových buněk, což by mohlo způsobit nenormální vzorování vlasů a vyústit v abnormální fenotyp.,

Mutace v SOX3 byly spojeny s X-vázaná mentální retardace s izolovanou deficiencí růstového hormonu (MIM 300123),22 a to i s X-spojený hypopituitarismus (MIM 312000).V hypopituitarismu spojeném s X bylo nalezeno 23 Mikroduplikací zahrnujících SOX3.23 V X-vázanou recesivní hypoparatyreóza (MIM 307700), vložení přibližně 340 kb intragenic fragment SNTG2 (MIM 608715) na 2p25.3 do Xq27.1 stránka 67 kb downstream SOX3 byl identifikován.24 tato událost vložení doprovází vymazání 23-25 kb, které zahrnuje palindrom specifický pro člověka., Jako základní patogenní mechanismus byl navržen poziční účinek na expresi SOX3.24 nedávno, Sutton et al. hlásili genomové přestavby, včetně microduplications a mazání v SOX3 regionu, u tří pacientů s XX mužský pohlavní zvrat (MIM 300833) s breakpointy v SOX3 regulační oblasti.25 i když přesné zarážky z těchto přestaveb jsou k dispozici z jejich studie, zdá se, že genomické oblasti podílejí na vložení účinků hlášených v naší studii je duplikována ve dvou ze tří pacientů hlášeny., Výše popsané pacientů s X-vázanou hypopituitarismus, X-vázanou recesivní hypoparatyreóza, nebo XX mužský pohlavní zvrat nemají hypertrichóza fenotyp.23-25 Navíc, ženy s Xq26-q28 delece, které mohou mít za následek ztrátu SOX3, rozvíjet předčasné ovariální selhání 1 (MIM 311360), ale ne hypertrichóza.,26-29 Společně tyto poskytují podporu pro hypotézu, že X-vázaná CGH s nebo bez skoliózy a spina bifida výsledky od vložení události zavedení nových DNA regulační prvky v rámci každé vložené sekvence, spíše než z vytvoření „pozice efekt“ fyzické oddělení genu od jeho vnitřní regulační prvky.

SOX3 úzce souvisí se SOX2 (MIM 184429), gen kódující klíčový regulátor pro kmenové buňky, ale dosud není známo, že by byl exprimován v HFs., Bylo prokázáno, že dermální papilární buňky exprimující Sox2 specifikují typy HF myší a indukují morfogenezi HF.30,31 S použitím RT-PCR (Tabulka č. 1), nemohli jsme zjistit SOX3 mRNA výraz v HFs izolované z vlasové pokožky kožní tkáně darované zdravých jedinců po kosmetické operaci, nebo z kůže vzorku z horní části paže probanda Čínské rodiny (Obrázek S4). Zdá se tedy rozumné spekulovat, že vložení zprostředkované palindromem mohlo vyvolat mimoděložní expresi SOX3 v rané fázi vývoje HF., Vložený fragment v čínské rodině může obsahovat další regulační prvky, a tím vést k dalším malformacím, včetně skoliózy. Shodou okolností, CNVs na 17q24 blízkosti SOX9 (MIM 608160), gen kódující základní regulátor HF kmenových buněk,32,33 příčinou autozomálně-dominantní CGH.5 Další studie jsou nutné k určení, zda aberantní exprese SOX3 nebo SOX9 mění vzorování vlasy jako zapletený do těchto studií.